訂購(gòu)信息：
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目錄號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
包裝 |
售價(jià) |
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X11384 |
Pronase E 鏈霉蛋白酶E |
250mg |
￥950.00 |
產(chǎn)品說(shuō)明：
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CAS號(hào) |
9036-06-0 |
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穩(wěn)定性 |
pH 5.0-9.0范圍內(nèi)高度穩(wěn)定，pH 8.8酶活性最強(qiáng) |
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兼容性 |
與許多DNARNA分離緩沖體系兼容 |
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質(zhì)量控制 |
約含25%醋酸鈣 |
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酶活性 |
≥3.5 umnits/mg solid |
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溶解性 |
在37°C, pH7.5的條件下， 溶解于含0.05M醋酸鈣的0.01M醋酸鈉溶液，溶解體系添加鈣離子可防止自發(fā)水解。 |
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失活方法 |
80 °C以上加熱15-20min使其完全失活。 |
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特異性 |
廣譜底物特異性;由多種非特異性內(nèi)/外切蛋白酶組成的混合物，可降解蛋白到單個(gè)氨基酸。 |
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儲(chǔ)存條件 |
凍干粉4C穩(wěn)定保存6個(gè)月。-20°C干燥凍存長(zhǎng)期保存 |
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運(yùn)輸 |
冰袋運(yùn)輸 |
產(chǎn)品描述
鏈霉蛋白酶E (Pronase E). 來(lái)源于灰色鏈霉菌的一組蛋白酶(Protease from Streptomyces griseus) ,至少包含細(xì)胞外絲氨酸蛋白醇在內(nèi)的三種蛋白酶活性。通常情況，絲氨酸蛋白酶具廣譜的底物特異性，通過(guò)分子上一一個(gè)天冬氨酸，一個(gè)組氨酸，和一個(gè)絲氨酸組成的活性位點(diǎn)來(lái)調(diào)控。本酶選擇性偏好水解谷氨酸或天冬氨酸羧基形成的肽鍵，常見(jiàn)的絲氨酸活性位點(diǎn)抑制劑可抑制其活性，如PMSF和DFP。 鏈霉蛋白酶E (PronaseE) ，還至少包含三種酪蛋白水解活性和一種氨基肽酶活性，這種酪蛋白水解酶分別命名為灰色鏈霉菌來(lái)源蛋白酶A (Streptomyces gniseus Protase A)，蛋白酶B (Streptomyces griseus Protease B)和胰酶(Sreptomyces griseus TIrypsin)。
因此，本制品可用于蛋白的大量或者完全降解，還可用來(lái)研究蛋白酶抑制劑，以及熱失活動(dòng)力學(xué)。本制品常用于核酸分離步驟，在添加0.2% SDS和10 mM EDTA的體系內(nèi)孵育0.5-3h即可達(dá)到目的。因其比已知的堿性蛋白酶在更高pH環(huán)境下，甚至0.2N NaOH溶液中，活性更強(qiáng)，因此非常適合不溶性蛋白的酶解實(shí)驗(yàn)，以及蛋白結(jié)構(gòu)分析。另，還可與膠原酶和胰酶聯(lián)合使用，以消化組織。也可作用純化糖蛋白生產(chǎn)糖肽。
使用方法
[注意] :本品應(yīng)用非常廣泛，具體的使用方法和工作濃度請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)來(lái)調(diào)整。
1. 儲(chǔ)存液制備:溶解于去離子水，配制成5-20mg ml的儲(chǔ)存液，若用于DNA或RNA分離步驟，建議將溶液56°C加熱處理15min,之后37°C孵育1h, 此步驟能促使酶發(fā)生自消化，以去除DNase和RNase污染。 之后將儲(chǔ)存液分成單次用量，-20°C凍存， 通常情況1年穩(wěn)定。
2. DNA分離:直接加入DNA制備體系(含有0.5-1% SDS以打破DNA-蛋白相互作用)，典型工作濃度范圍250-500μg蛋白/ml, 于37°C孵育1-4h。 [注意: 建議工作濃度范圍在250-2000g/ml,依照具體情況而定]。
3.蛋白水解:溶解約0.2uM蛋白到0.2ml 50mM碳酸氫銨緩沖液，pH8.0 (或磷酸鹽緩沖液，pH7.0) ，之后按照1% (w/w)加入Pronase E,于37°C孵育24h。 根據(jù)情況，有可能需要添加4% (w/w)氨肽酶M，并于37°C再孵育18h。
注意事項(xiàng)：
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應(yīng)用或其他用途。
